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· 上 傳 者： 上海極威生物科技有限公司
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· 資料簡(jiǎn)介： 11月9日消息，據(jù)極威生物報(bào)道，檢測(cè)人Ⅳ型膠原蛋白（Ⅳ-C）的elisa試劑盒樣本處理要求@市場(chǎng)透露介紹稱，本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人 Ⅳ型膠原蛋白（Ⅳ-C）的含量。 l 有效期：6個(gè)月 l 保存條件：2-8℃ l 本試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床診斷 檢測(cè)人Ⅳ型膠原蛋白（Ⅳ-C）的Elisa試劑盒樣本處理要求@市場(chǎng)透露，實(shí)驗(yàn)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人Ⅳ型膠原蛋白 （Ⅳ-C）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并 徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成 *終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人Ⅳ型膠原蛋白（Ⅳ-C）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波 長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。 檢測(cè)人Ⅳ型膠原蛋白（Ⅳ-C）的Elisa試劑盒樣本處理要求@市場(chǎng)透露，樣本處理及要求： 1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000 ×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞 會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體 積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。 推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組 織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘， 取上清檢測(cè)。 4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯?于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 注：標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。 ELISA試劑盒用戶：ELISA樣本保存有哪些影響？ 極威生物解答：樣本的保存：在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、會(huì)造成假陽(yáng)性；為避免上述問(wèn)題，在ELISA試劑盒測(cè)定血清標(biāo)本時(shí)能新鮮采集；如果不能立即測(cè)定，根據(jù)相應(yīng)的時(shí)間保存相應(yīng)的溫度，5 d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)-20℃低溫凍存；如凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不可強(qiáng)烈振蕩。
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